蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)的多位点磷酸化:细胞周期调控和磷酯刺激磷酸化位点的鉴定。
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弗林特AJ，格宾克MF，弗兰扎BR Jr，希尔德，唐克斯NK
蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)的多位点磷酸化:细胞周期调控和磷酯刺激磷酸化位点的鉴定。
EMBO J. 1993 5月;12(5):1937-46。
- PubMed ID
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8491187 (PubMed视图］
- 摘要
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非跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B由435个氨基酸组成，其中c端114个残基参与控制该酶的定位和功能。对c端片段序列的检查揭示了一些潜在的磷酸化位点。我们发现PTP1B在体内被seryl残基磷酸化。PTP1B磷酸化的增加伴随着细胞周期从G2期到M期的转变。两种主要的胰蛋白酶肽出现在有丝分裂细胞PTP1B的二维图中。其中一个与体外有丝分裂蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶p34cdc2在Ser386位点磷酸化后产生的肽相结合:周期蛋白b。有丝分裂细胞中导致PTP1B电泳迁移显著延迟的磷酸化位点已通过位点定向突变确定为Ser352位点。目前还不清楚导致这种修饰的激酶。我们还发现，phorbol酯TPA刺激HeLa细胞可以增强PTP1B的磷酸化。二维磷酸肽图谱显示，磷酸盐的大部分是在一个单一的胰蛋白酶肽。该位点被鉴定为Ser378，在体外也是蛋白激酶C (PKC)磷酸化的位点。 Thus the TPA-stimulated phosphorylation of PTP1B in vivo appears to result directly from phosphorylation by PKC. The effect of phosphorylation on the activity of PTP1B has been examined in immunoprecipitates from TPA-treated and nocodazole-arrested cells. TPA treatment does not appear to affect activity directly, whereas the activity of PTP1B from nocodazole-arrested cells is only 70% of that from asynchronous populations.