人胰脂肪酶cDNA的克隆与鉴定。
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Lowe ME, Rosenblum JL, Strauss AW
人胰脂肪酶cDNA的克隆与鉴定。
生物化学杂志，1989年11月25日;264(33):20042-8。
- PubMed ID
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2479644 (PubMed视图］
- 摘要
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胰脂肪酶(triacylglycerol acylhydrolase, EC 3.1.1.3)在肠腔中将膳食中的长链三酰甘油水解为游离脂肪酸和单酰甘油。在胆汁酸存在的情况下，脂肪酶的活性受到脂肪酶的刺激。为进一步研究脂肪酶和脂肪酶蛋白结构与功能特性的关系，从兔抗人胰脂肪酶多克隆抗体筛选的lambda gt11 cDNA文库中分离到人胰脂肪酶的cDNA。全长cDNA克隆全长1477个碱基对，包含一个开放的阅读框，编码465个氨基酸的蛋白质，其中包括一个16个氨基酸的信号肽。核苷酸序列与狗胰脂肪酶cDNA有69%相同。预测的nh2端蛋白序列与已公布的人胰脂肪酶nh2端蛋白序列吻合较好，与猪胰脂肪酶蛋白序列吻合85%，与犬胰脂肪酶蛋白序列吻合70%。在许多脂质结合蛋白中，Ser-153周围的同源区是保守的。人肝脂肪酶和脂蛋白脂肪酶与胰脂肪酶具有广泛的同源性，这表明这三种蛋白质是一个小基因家族的成员。从cDNA转录的mRNA的体外翻译产生了预期分子大小的蛋白质，该蛋白质可被微粒体膜处理，以产生具有适当信号肽切割的乙醇化蛋白质。RNA印迹分析显示胰脂肪酶具有组织特异性。 Thus, for the first time, a full length human pancreatic lipase cDNA has been isolated and characterized. The demonstrated regions of homology with other lipases will aid definition of interactions with substrate and colipase through site-specific mutagenesis.