存在两个D-alanine: D-alanine连接酶在大肠杆菌:ddlA基因的克隆和测序,ddlA和DdlB酶的纯化和表征。
文章的细节
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引用
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Zawadzke勒,Bugg TD,沃尔什CT
存在两个D-alanine: D-alanine连接酶在大肠杆菌:ddlA基因的克隆和测序,ddlA和DdlB酶的纯化和表征。
生物化学。1991年2月12日,30 (6):1673 - 82。
- PubMed ID
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1993184 (在PubMed]
- 文摘
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两个不同的基因编码D-alanine: D-alanine (D-Ala-D-Ala)连接酶(ADP)形成活动在大肠杆菌克隆互补的大肠杆菌菌株ST640(λ112)缺乏D-Ala-D-Ala连接酶活动的λ图书馆大肠杆菌DNA。这两个基因之一,被指定为ddlB,已经与ddl相同基因测序(罗宾逊,交流,该D.L.《理发师陶德》,J。、& Donachie W.D. (1986) j . Bacteriol。167年,809 - 817]。我们描述了subcloning和其他基因的DNA测序,指定为ddlA相似性的基础上与鼠伤寒沙门氏菌ddlA基因(涂抹,E。、Zawadzke L.E.Botstein D。&沃尔什,比较温度(1988)生物化学27岁,3701 - 3708]。大肠杆菌的氨基酸序列预测DdlA酶显示,90%同源性与美国沙门氏菌感染DdlA序列。ddlB基因被使用subcloned聚合酶链反应到一个包含一个优化的核糖体结合位点的表达载体,它表达了ddlB酶大于50%可溶性细胞蛋白质。DdlA和DdlB酶纯化超过90%的同质性和活动特点。