外围苯二氮受体:描述在人类T-lymphoma Jurkat细胞。
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科斯塔B, Salvetti,罗西L, Spinetti F,丽娜,Chelli B, Rechichi M Da波佐E, Gremigni V,马提尼C
外围苯二氮受体:描述在人类T-lymphoma Jurkat细胞。
摩尔杂志。2006年1月,69 (1):37-44。Epub 2005年9月27日。
- PubMed ID
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16189298 (在PubMed]
- 文摘
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外围苯二氮受体(PBR)已经被认为是一种很有前途的药物癌症治疗的目标,和一些配体已经开发出来。人类T-lymphoma Jurkat细胞被认为是缺乏PBR和通常被用作负控制证明PBR的特异性配体的影响。令人惊讶的是,我们证明PBR蛋白表达在这个细胞系通过免疫印迹和免疫细胞化学检测使用特定anti-PBR抗体。PBR胞内定位在线粒体和细胞核证明,证明了共焦和电子显微镜。绑定[H](3) 4的氯的导数安定[(3)H] 7-chloro-5 - (4-chlorophenyl) 1, 3-dihydro-1-methyl-2H-1, 4-benzodiazepin-2-one (ro5 - 4864)和异喹啉酰胺衍生物[(3)H] 1 - (2-chlorophenyl) -N-methyl-N -(1 -甲基丙基)3 isoquinolinecarboxamide (PK11195)证明单个类的结合位点不同寻常的亲和常数(K (d)) 1.77 + / - 0.30和2.20 + / - 0.20 microM,分别。经典的配体的药理表明PK11195是最强有力的抑制剂在放射性配体结合化验ro5 - 4864和安定,而氯硝西泮,铁路公司那样的特定配体受体,显示K(我)> 1.0 x 10 (4) m .反向transcriptase-polymerase连锁反应的组合策略和印迹实验中,我们成功地分离和克隆全长Jurkat PBR cDNA、叫JuPBR。JuPBR基因显示两个单核苷酸多态性导致两个替换,Ala147——>苏氨酸和His162——>精氨酸,PBR的胺基酸序列。总之,第一次,我们演示了PBR表达Jurkat细胞:蛋白结合的经典PBR配体与微摩尔的亲和常数和提出改良酸性氨基酸序列的两个基因多态性的检测。