环核苷酸磷酸二酯酶4活动的测量通过无机磷酸盐的量化与孔雀石绿。

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李朱年代,Gan Z, Z,刘Y,杨X,邓P,谢Y,余米,廖廖H,赵Y,赵L F

环核苷酸磷酸二酯酶4活动的测量通过无机磷酸盐的量化与孔雀石绿。

肛门詹学报。2009年3月16日,636 (1):105 - 10。doi: 10.1016 / j.aca.2009.01.035。Epub 2009年1月22日。

PubMed ID

19231363 (在PubMed

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文摘

光谱方法研究了衡量重组人类的活动环核苷酸磷酸二酯酶4 (PDE4),基于使用孔雀石绿(MLG)量化磷酸盐释放从腺苷一磷酸(AMP)小牛肠碱性磷酸酶的作用(CIAP)。磷钼酸甘油2%最低生活保障和稳定之间的复杂,其吸光度在630纳米磷酸浓度成正比与抵抗常见的物质PDE4除了罂粟碱反应混合物。CIAP Michaelis-Menten常数(K (m))的(12.0 + / - -2.1)microM (n = 3) AMP在pH值为7.4,并对EDTA低于0.20毫米。由耦合端点检测在30.0 ul (1) CIAP反应持续时间30分钟内,利率释放磷酸盐在PDE4反应混合物中含有10.0毫米MgCl(2)和0.10毫米EDTA线性响应PDE4的大量广泛的范围。PDE4的同时,K (m) (8.8 + / - -0.2) microM (n = 2),锌离子抑制PDE4和rolipram抑制常数约10纳米。这些结果支持,通过耦合端点检测,这种方法是有前途的屏幕没有干扰的PDE抑制剂MLG磷酸盐的测定。

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药物靶点

药物	目标	类	生物	药理作用	行动
罂粟碱	cAMP-specific 3 ', 5 '环磷酸二酯酶4 b	蛋白质	人类	是的	抑制剂	细节