晶体结构和定位诱变pterin-bound人类的苯丙氨酸羟化酶。
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Erlandsen H, Bjorgo E, Flatmark T,史蒂文斯RC
晶体结构和定位诱变pterin-bound人类的苯丙氨酸羟化酶。
生物化学,2000年3月7日,39(9):2208 - 17所示。
- PubMed ID
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10694386 (在PubMed]
- 文摘
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的晶体结构二聚的催化域(残留118 - 424)的人类PheOH (hPheOH),共晶的氧化形式代数余子式(7 8-dihydro-L-biopterin BH(2)),已经确定在2.0一项决议。蝶呤绑定第二协调领域的催化铁(C4a原子是6.1),并通过几个氢键相互作用两个水分子协调铁,以及主链羰基氧Ala322, Gly247, Leu249 Leu249的主链酰胺。一些重要的构象变化的活性部位在蝶呤绑定。残留245年和250年之间的循环移动的方向铁,从而允许几个重要蝶呤环形成氢键。蝶呤代数余子式的理想取向分子氧绑定在一个桥接铁和蝶呤之间的位置。蝶呤环形成一个芳香与Phe254 pi-stacking互动,和Tyr325有助于定位蝶呤环及其dihydroxypropyl侧链的疏水相互作用。特别感兴趣的hPheOH x黑洞(2)二进制的发现Glu286氢键是复杂结构的一个水分子协调的铁以及水分子氢键的N3蝶呤戒指。位点的突变Glu286 (E286A和E286Q), Phe254 (F254A和F254L),和Tyr325 (Y325F)已经证实Glu286的重要贡献和Phe254的正常定位蝶呤辅因子和hPheOH的催化活性。Tyr325也有助于蝶呤的正确定位,但是没有直接催化反应函数,在协议与获得的结果与鼠TyrOH [Daubner, s . C。Fitzpatrick, p . f .(1998)生物化学37岁,16440 - 16444]。叠加的二进制hPheOH.BH(2)复杂的晶体结构ligand-free鼠PheOH(包含监管和催化域)[科比,B。詹宁斯,即G。,房子,c . M。, Michell, B. J., Goodwill, K. E., Santarsiero, B. D., Stevens, R. C., Cotton, R. G. H., and Kemp, B. E. (1999) Nat. Struct. Biol. 6, 442-448] reveals that the C2'-hydroxyl group of BH(2) is sufficiently close to form hydrogen bonds to Ser23 in the regulatory domain. Similar interactions are seen with the hPheOH.adrenaline complex and Ser23. These interactions suggest a structural explanation for the specific regulatory properties of the dihydroxypropyl side chain of BH(4) (negative effector) in the full-length enzyme in terms of phosphorylation of Ser16 and activation by L-Phe.