tetA和rpsL协同作战提供high-stringency积极和消极选择细菌人工染色体向量。

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Stavropoulos助教,斯特拉斯迪CA

tetA和rpsL协同作战提供high-stringency积极和消极选择细菌人工染色体向量。

基因组学。2001年2月15日,72 (1):99 - 104。

PubMed ID

11247671 (在PubMed

]

文摘

细菌人工染色体(bacmid)向量用于稳定传播大,复杂的DNA片段的克隆和功能基因组学的核心技术。最简单的方法分析bacmid克隆会直接诱变或等位基因交换协议利用积极的和消极的选择标记。三个不同的负选择标记的效用函数的上下文中bacmid向量因此调查:sacB从枯草芽孢杆菌,授予对蔗糖的敏感性;从TN10 tetA对四环素产生了耐药性,渗透压敏感性,对卡那霉素、链霉素敏感;和rpsL大肠杆菌,授予对链霉素敏感。当单独表达上下文中的bacmid向量,这些标记所带来的负选择类似的紧缩,对媒体选择性电镀效率为2.3 x 10 (5), 9.4 x 10(4),分别和5.7 x 10 (5)。然而coexpression rpsL和tetA导致协同增强渗透、卡那霉素、链霉素敏感性,严格选择的大约大约50 - 1000倍,获得与rpsL或tetA仅约20倍以上,使用sacB获得。rpsL和tetA因此作为最有效的积极的和消极的选择标记系统描述。

DrugBank数据引用了这篇文章

药物靶点

药物	目标	类	生物	药理作用	行动
卡那霉素	30年代S12核糖体蛋白质	蛋白质	大肠杆菌(应变K12)	是的	抑制剂	细节