糖皮质激素受体a型和b型的分子鉴定和表征。
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Yudt MR, Cidlowski JA
糖皮质激素受体a型和b型的分子鉴定和表征。
Mol Endocrinol. 2001 july;15(7):1093-103。
- PubMed ID
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11435610 (在PubMed］
- 摘要
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人糖皮质激素受体(hGRalpha)是一种配体激活的转录因子，调节皮质类固醇激素的生理效应，对生命至关重要。hGRalpha最初于1986年克隆，据报道是一个包含777个氨基酸(分子质量为94 kDa)的单一蛋白质物种，具有转录活性。然而，利用各种哺乳动物组织和细胞系获得的生化数据一致显示，有一种额外的、略小的第二个hGR蛋白(分子质量= 91 kDa)不被转录不活跃和显性阴性、非激素结合的hGRbeta亚型特异性抗体识别。我们在这里报道，当一个GR cDNA转染COS-1细胞，或在体外转录和翻译时，观察到两种形式的受体，类似于在含有内源性GR的细胞中看到的受体。这些数据表明，两种形式的hGRalpha是由同一基因的替代翻译产生的，因此被命名为GR- a和GR- b。为了验证这一假设，我们研究了蛋氨酸27 (M27)对应的内部ATG密码子作为GR潜在的替代翻译起始位点的作用。在人、大鼠和小鼠GR cDNA中，该ATG密码子突变为ACG，导致生成一个94 kda的单一蛋白质物种GR- a。此外，将初始ATG密码子突变为ACG (Met 1到Thr)也会产生单一的、较短的蛋白质物种GR-B (91 kDa)。Kozak翻译起始序列的突变强烈表明，一种泄漏的核糖体扫描机制负责生成GR-A和-B亚型。使用肽特异性抗体的Western blot分析显示，A和B受体形式都存在于人类细胞系中。两种受体在配体活化后表现出相似的亚细胞定位和核易位。对hGR-A和hGR-B在不同糖皮质激素反应启动子下的功能分析显示，较短的hGR-B在基因转激活方面的效果几乎是较长的hGR-A的两倍，但在转抑制方面则没有。