糖皮质激素敏感和耐药人白血病细胞糖皮质激素受体突变体的克隆和表达。
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鲍尔斯JH，希尔曼公司，唐DC，哈蒙JM
糖皮质激素敏感和耐药人白血病细胞糖皮质激素受体突变体的克隆和表达。
癌症杂志1993年9月1日;53(17):4059-65。
- PubMed ID
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8358735 (在PubMed］
- 摘要
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从糖皮质激素敏感的人白血病cemc - c7细胞中分离出糖皮质激素耐药突变体，确定了其无受体(r-)和活化不稳定(act1)表型的分子基础。从r- ICR27TK的互补DNA文库中分离出的克隆。3个细胞，其中一个糖皮质激素受体(GR)基因缺失，在密码子753的第三位有一个腺苷转胸苷激酶，导致苯丙氨酸取代亮氨酸。该突变基因(GR753F)只有正常基因反式激活活性的13%，并产生M(r) 92000受体蛋白，与ICR27TK中的r-表型相同。3细胞。从亲本糖皮质激素敏感的6TG1.1细胞文库中分离的互补DNA克隆分析表明，这些细胞既表达正常的GR基因(GR+)，也表达GR753F基因。因此，其基因型为GR+/GR753F。从糖皮质激素耐药活化不稳定基因3R7的互补DNA文库中分离的克隆分析。6 tg。4个细胞显示存在GR753F基因和另一个突变基因(GR421Y)，该突变基因在密码子421的第二个位置包含鸟苷向腺苷的转变，导致dna结合域近端锌指的第一个半胱氨酸被酪氨酸取代。该突变体没有反式激活活性，但具有正常的配体结合特性。 Thus, the genotype of act1 3R7.6TG.4 cells is GR421Y/GR753F. Consequently, the sequence-specific DNA-binding activity of receptors in act1 cells is attributable to the GR753F gene, while the ligand-binding activity seen in intact cells is attributable to the GR421Y gene. These results provide a direct explanation for the r- and act1 phenotypes of glucocorticoid-resistant cells and demonstrate that glucocorticoid-sensitive cells derived from CEM-C7 cells contain a heterogeneous population of normal and mutant receptors.