过渡态模型和机制的亲核芳香取代反应催化由人类谷胱甘肽S-transferase M1a-1a。
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Patskovsky Y, Patskovska L, Almo SC, Listowsky我
过渡态模型和机制的亲核芳香取代反应催化由人类谷胱甘肽S-transferase M1a-1a。
生物化学。2006年3月28日,45 (12):3852 - 62。
- PubMed ID
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16548513 (在PubMed]
- 文摘
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一个活跃的站点His107残渣区分人类谷胱甘肽S-transferase hGSTM1-1从其他哺乳动物Mu-class消费税。hGSTM1a-1a的晶体结构与绑定谷胱甘肽(GSH)是解决1.9决议,和定点诱变支持这样的结论:一个质子转移发生在这束缚水催化部位主要作为质子受体的谷胱甘肽硫醇基His107质子转移。第二substrate-binding网站的结构(H-site)决定从hGSTM1a-1a包裹着1-glutathionyl-2, 4-dinitrobenzene (GS-DNB)之间的反应形成的水晶谷胱甘肽和1-chloro-2 4-dinitrobenzene (CDNB)。在这种结构中,GSH-binding网站(G-site)占领的谷胱甘肽产品的一部分在相同配置的enzyme-GSH复杂,和侧链间二硝基苯环锚定Tyr6, Leu12, His107 Met108, Tyr115。这种取向提出了一个截然不同的过渡态的结构,证实hGSTM1a-1a包裹着过渡态类似物1 s - (glutathionyl) 2, 4, 6-trinitrocyclohexadienate (Meisenheimer复杂)。GSTM1a-1a动力学数据表明kcat (CDNB)反应是3倍以上kcat (FDNB),即使非酶的二阶速率常数是1-fluoro-2超过50倍大,4-dinitrobenzene (FDNB),基板和产品是相同的。此外,公里(FDNB)约20倍不到公里(CDNB)。结果一致的机制形成过渡态病原的亲核芳香取代反应。数据获取与活性位点突变体Tyr115支持过渡状态,Tyr6, His107侧链参与Meisenheimer复杂的稳定通过交互的邻位硝基CDNB或FDNB并提供洞察的方式消费税调整来适应不同基质。