一个asparagine-phenylalanine替换占催化差异hGSTM3-3μ谷胱甘肽S-transferases和其他人类类。
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Patskovsky青年志愿,Patskovska LN, Listowsky我
一个asparagine-phenylalanine替换占催化差异hGSTM3-3μ谷胱甘肽S-transferases和其他人类类。
生物化学,1999年12月7日,38 (49):16187 - 94。
- PubMed ID
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10587441 (在PubMed]
- 文摘
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hGSTM3亚基,这是优先表达细胞细胞,最大序列分歧在人类的谷胱甘肽S-transferasesμ类。催化之间的差异来确定结构基础hGSTM3-3和其他μ类酶,嵌合蛋白质设计的模块化交换发散hGSTM3和hGSTM5 c端域的子单元。更换24残留的c端部分的单元生产嵌合酶的催化特性,反映那些野生型酶的糖基派生。删除的三肽c端扩展发现只有在hGSTM3对催化亚基没有影响。的晶体结构决定ligand-free hGSTM3亚基表明Asn212残渣的c端域附近部分疏水侧链形成的集群Ile13, Leu16, Leu114, Ile115, Tyr119 Ile211, Trp218。因此,一系列的点突变引入hGSTM3单元,它确实是确定Y119F突变大大增强酶的流动率为亲核芳香取代反应。更引人注目的效果观察的双突变(Y119F / N212F)有一个k(猫)/ k (m) (CDNB)值为7.6 x 10 (5) s (-) (1) m(-)(1)相比4.9 x 10 (3) s (-) (1) m(-)(1)野生型hGSTM3-3酶。的极地Asn212代替板式换热器残渣中发现谷胱甘肽S-transferases其他μ的同源位置类,因此,由hGSTM3-3对催化有显著影响。