哺乳动物Delta1-pyrroline-5-carboxylate合成酶的分子酶学。替代拼接捐赠者利用生成具有不同敏感性的亚型鸟氨酸抑制。
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胡锦涛CA,林WW,奥比奖C,山谷D
哺乳动物Delta1-pyrroline-5-carboxylate合成酶的分子酶学。替代拼接捐赠者利用生成具有不同敏感性的亚型鸟氨酸抑制。
J生物化学杂志。1999年3月5日,274 (10):6754 - 62。
- PubMed ID
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10037775 (在PubMed]
- 文摘
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Delta1-Pyrroline-5-carboxylate合成酶(P5CS;欧共体不分配),线粒体内膜,ATP, NADPH-dependent双功能酶,催化谷氨酸的减少Delta1-pyrroline-5-carboxylate,新创生物合成的关键步骤的脯氨酸和鸟氨酸。我们利用植物P5CS发表序列搜索表达序列标签数据基础和克隆两个完整的人类P5CS互补dna必威国际app不同长度6碱基对(bp)的开放阅读框。短cDNA有2379 - bp 793年开放阅读框编码一种蛋白质残留;”生成的长cDNA、外显子滑”,一种可变剪接,包含一个额外的6-bp插入后bp + 711的短形式导致包含两个额外的氨基酸在该地区预测P5CS gamma-glutamyl激酶活性部位。长形式主导的组织除了肠道检查。我们也孤立的相应的长期和短期小鼠P5CS成绩单。确认身份的假定的P5CS互补,我们人类表达形式在gamma-glutamyl激酶和磷酸gamma-glutamyl reductase-deficient株酿酒酵母和显示他们授予脯氨酸原养型。此外,我们发现表达的小鼠假定P5CS互补授予脯氨酸原养型P5CS-deficient中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)。我们利用稳定CHO-K1细胞转化株比较长时间运行和短小鼠的生化特征P5CS亚型。 We found that both confer P5CS activity and that the short isoform is inhibited by L-ornithine with a Ki of approximately 0.25 mM. Surprisingly, the long isoform is insensitive to ornithine inhibition. Thus, the two amino acid insert in the long isoform abolishes feedback inhibition of P5CS activity by L-ornithine.