净化、动力学特性和cDNA克隆哺乳动物betaine-homocysteine甲基转移酶。
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净化、动力学特性和cDNA克隆哺乳动物betaine-homocysteine甲基转移酶。
生物化学杂志。1996年9月13日;271 (37):22831 - 8。
- PubMed ID
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8798461 (在PubMed]
- 文摘
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猪的肝脏betaine-homocysteine甲基转移酶(BHMT;EC)纯化同质性,为甜菜碱和米氏常数,dimethylacetothetin,和L-homocysteine 23, 155和32 microM分别。催化的最大速度是47-fold大使用dimethylacetothetin作为甲基供体与甜菜碱。部分氨基酸序列猪BHMT得到,和inosine-containing冗余寡核苷酸引物被用来放大一个815 -碱基对序列的猪cDNA聚合酶链反应(PCR)。非简并基于猪互补脱氧核糖核酸合成的寡核苷酸引物,用于隔离463碱基对的人类cDNA片段PCR。人类DNA PCR产品被用来屏幕由斑块杂交cDNA文库,和互补编码人类BHMT孤立。人类cDNA报道的主要结构,开放阅读框编码一个406 - 44969先生的残留蛋白质。人类BHMT显示有限的推导氨基酸序列同源性细菌维生素B12-dependent蛋氨酸合成酶(EC)。包含人类BHMT cDNA融合质粒在坐标系的N末端变成了大肠杆菌的β-半乳糖,和转化株表达BHMT活动,这种活动是缺席野生型大肠杆菌。