功能耦合的半胱氨酸- 226和半胱氨酸- 296 glucagon-like peptide-1 (GLP-1)受体表明接近一个二硫键激活的口袋里。
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曼RJ萨巴赫年代,de Maturana RL, Sinfield JK,唐纳利D
功能耦合的半胱氨酸- 226和半胱氨酸- 296 glucagon-like peptide-1 (GLP-1)受体表明接近一个二硫键激活的口袋里。
肽。2010年12月31日(12):2289 - 93。doi: 10.1016 / j.peptides.2010.09.015。Epub 2010年10月1日。
- PubMed ID
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20869417 (在PubMed]
- 文摘
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G protein-coupled受体(GPCRs)是七个跨膜α螺旋(tm) 7日整体膜蛋白发挥核心作用在细胞信号和许多药物的作用。晶体结构的几个家庭GPCRs显示二硫键连接的存在跨膜螺旋3 (TM3)第二个细胞外循环(ECL2),使ECL2稳定和导致配体结合的口袋里。家庭B GPCRs没有明显的序列的身份与家庭分享但是分享两个保守的半胱氨酸在拓扑等价的位置。因为没有可用的晶体结构7 tm域的任何家庭B GPCR,我们使用诱变与药理分析调查ECL2和保守的半胱氨酸残基的作用。我们突变半胱氨酸- 226,在细胞外的TM3 glucagon-like peptide-1 (GLP-1)受体,丙氨酸和观察到的38倍减少GLP-1效力。有趣的是,这种力量损失恢复了额外的半胱氨酸- 296替换ECL2丙氨酸。与完整的保护这些家庭B GPCRs半胱氨酸残基,这种功能耦合建议二硫键的存在。进一步诱变证明效力C226A突变体观察到低,相比C226A-C296A双突变体,是笨重的结果发布半胱氨酸- 296侧链的性质。因为这表明ECL2接近受体激动剂激活口袋,ECL2的丙氨酸扫描进行了证实了这个循环的重要作用agonist-induced受体激活。