酶特性的同种型混合重组谷氨酸脱羧酶(rGAD67/65)酵母中表达。
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通JC,麦凯IR,下巴J,法律RH法K,罗利乔丹
酶特性的同种型混合重组谷氨酸脱羧酶(rGAD67/65)酵母中表达。
生物科技J》。2002年8月7日,97 (2):183 - 90。
- PubMed ID
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12067524 (在PubMed]
- 文摘
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背景和目的:谷氨酸脱羧酶(GAD, EC 4.1.1.15)催化作用的转换谷氨酸氨基丁酸(GABA)。65 kDa同种型,GAD65的自身抗原在1型糖尿病,而GAD67不是。混合互补脱氧核糖核酸是由融合人类cDNA GAD67的氨基酸1 - 101的人类cDNA GAD65的氨基酸96 - 585;(r)重组蛋白在酵母表达,被相当于哺乳动物大脑迦得糖尿病患者血清的免疫反应性。我们在这里报告rGAD67/65酶和分子的性质。方法:研究进行酶活性的rGAD67/65生产3 h-gaba从3 h-glutamate、酶动力学,结合酶的辅因子磷酸吡哆醛(PLP),稳定pH值的差异,温度和持续时间的存储和抗原反应性与各种GAD-specific抗血清。结果:rGAD67/65的性质与公布的数据为哺乳动物大脑广泛性焦虑症(括号)。其中包括特定的酶活性为22.7 (16.7)nKat,最佳pH值7.4酶活性(6.8),K (m) 1.3(- 1.3)毫米,有效的非共价结合代数余子式PLP, autoantigenic效力高。rGAD67/65稳定性的最优/ 3个月在-80摄氏度,或在冻干的形式在-20度C。结论:混合rGAD67/65酶和其他性质类似的混合亚型迦得准备从哺乳动物大脑所描述的其他地方,除了先前描述的类似的免疫反应性。