人类的溶酶体alpha-glucosidase。表征催化部位。
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马何曼思MM,克洛斯,范Beeumen J, Oostra BA,重用者AJ
人类的溶酶体alpha-glucosidase。表征催化部位。
J生物化学杂志。1991年7月25日,266(21):13507 - 12所示。
- PubMed ID
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1856189 (在PubMed]
- 文摘
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底物类似物conduritol B环氧(CBE)被证明是一个活跃的人的溶酶体alpha-glucosidase定点抑制剂。竞争模式抑制了糖原作为自然和4-methylumbelliferyl-alpha-D-glucopyranoside人工基质。酶的失活时间和浓度依赖性,导致CBE的共价结合。催化活性需要绑定。CBE-labeled肽含有溶酶体的催化残alpha-glucosidase被孤立,被microsequencing和氨基酸分析。肽似乎来自阿尔法淀粉酶之间高度保守的蛋白质域,麦芽糖酶、葡糖淀粉酶,transglucanosylases。基于序列相似性和CBE绑定机制,asp - 518预测是必要的羧酸盐溶酶体alpha-glucosidase的活性部位。asp - 518和其他的功能重要性残留在催化部位表达等研究体外诱变处理alpha-glucosidase cDNA瞬变转染COS细胞。替换的asp - 513 glu - 513显示干扰转译后的修改和胞内运输alpha-glucosidase前体。残留trp - 516和asp - 518显示为催化功能是至关重要的。