参数的意义- 107和glu - 108催化机理的人类gamma-glutamyl转肽酶。识别由定点诱变。
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Ikeda Y,藤井裕久J,谷口N
参数的意义- 107和glu - 108催化机理的人类gamma-glutamyl转肽酶。识别由定点诱变。
J生物化学杂志。1993年2月25日,268 (6):3980 - 5。
- PubMed ID
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8095045 (在PubMed]
- 文摘
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野生型和突变体酶的催化性质的表达产生的cDNA (gamma-glutamyl转肽酶)COS-1细胞进行了分析。替换的赖氨酸Asn - 100, glu - 102 Gln,和参数- 112,-139年、-147年和-150年Gln导致表达充分活跃的酶。更换参数- 107与Gln或导致酶活性完全丧失,而替换赖氨酸导致部分损失的活动,表明正电荷在107位置对酶活性至关重要。在参数- 107 -赖氨酸突变,捐赠者的明显公里L-gamma-glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide相比增加8.4倍的野生型酶。尽管32%的野生型水解活性保留在这个突变,活动不能被添加一个受体基质,增强glycylglycine,表明转肽作用的反应是特别预防的。替换glu - 108 Gln glycylglycine明显公里增加8.5倍,同时增加供体的明显公里只有1.6倍。明显的Vmax下降到4 - 5%的野生型基质。这些数据表明,参数- 107在衬底绑定而不是催化中起着重要作用,glu - 108是一个重要的,尽管不是必要的,参与者在受体结合和催化。