人类gamma-glutamyl转肽酶涉及守恒的天冬氨酸残基的突变体和独特的半胱氨酸残基光亚基。
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Ikeda Y,藤井裕久J,谷口N,迈斯特
人类gamma-glutamyl转肽酶涉及守恒的天冬氨酸残基的突变体和独特的半胱氨酸残基光亚基。
J生物化学杂志。1995年5月26日,270 (21):12471 - 5。
- PubMed ID
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7759490 (在PubMed]
- 文摘
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与氨基酸替换变异人类gamma-glutamyl转肽酶光亚基在Asp中残留守恒的几个物种,和独特的半胱氨酸残基(半胱氨酸- 454),是准备和杆状病毒昆虫细胞表达系统。更换asp - 423由阿拉巴马州或Glu导致酶活性的主要损失,符合的结论asp - 423是必不可少的活动。突变体中半胱氨酸- 454取代了阿拉巴马州完全活跃,显示独特的光催化亚基硫醇不是必需的。水解反应的动力学分析L-gamma-glutamyl-p-nitroanilide表明asp - 423突变体的减少活动的结果是一个价值极高的衬底公里,这是一个多1000倍比野生型酶,而Vmax却降低了只有不到90倍。结果表明,asp - 423,和一定程度上的asp - 422,静电相互作用与alpha-amino组gamma-glutamyl供体基质。虽然还需要进一步的研究来评估可能的反应包括函数(或质子)中继系统,目前的研究表明,gamma-glutamyl一半的底物结合静电酶上的特定群体;这有助于gamma-glutamyl酶的形成。