细胞外的半胱氨酸残基的功能分析人类多肽运输有机阴离子,OATP2B1。
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Hanggi E, Grundschober AF,电邮,Meier PJ,圣皮埃尔MV
细胞外的半胱氨酸残基的功能分析人类多肽运输有机阴离子,OATP2B1。
摩尔杂志。2006年9月,70(3):806 - 17所示。Epub 2006 6月5。
- PubMed ID
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16754786 (在PubMed]
- 文摘
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有机阴离子运输多肽(OATP)总科成员2 b1 (OATP2B1)介导的甾类激素前体在胎盘和选择药物,肝、乳腺、大脑和肠道。这一行动被巯基试剂调制。共同OATPs第九是一个大型的跨膜域之间的细胞外循环和X 10保守的半胱氨酸。阐明结构关系的半胱氨酸ectodomain丰富,截断OATP2B1缺乏10细胞外半胱氨酸(OATP2B1 (delta489 - 557))和10 OATP2B1突变体包含个人Cys-to-Ala替换在CHO-K1细胞生成和表达。immunolocalization、细胞表面表达的运输活动,和免费的半胱氨酸标签N-biotinoylaminoethylmethane-thiosulfonate突变的蛋白质和野生型OATP2B1比较。OATP2B1积累细胞(delta489 - 557)。九Cys-to-Ala替换,C489A, C495A、C504A C516A, C520A, C539A, C541A, C553A,和C557A misprocessed,主要出现core-glycosylated, 60-kDa蛋白质和180 kda复合物。只有C493A完全75 - kda糖化蛋白表达在细胞表面。Thapsigargin部分纠正misprocessing突变体。与OATP2B1相比,C493A C557A运送estrone-3-sulfate和硫酸脱氢表雄酮效率较低,而所有其他突变体功能受损。 MTSEA labeled free cysteines in all Cys-to-Ala mutants but not in OATP2B1, suggesting that all 10 extracellular cysteines are normally disulfide-bonded. Our findings show that the trafficking and function of OATP2B1 is vulnerable to changes in the cysteine residues of extracellular loop IX-X.