人P450 IIB1的cDNA克隆、序列和cDNA定向表达:从19号染色体CYP2B位点获得的一个正常和两个变异cDNA的鉴定以及IIB mrna在人肝脏中的差异表达。
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山野S, Nhamburo PT，青山T, Meyer UA，稻叶T, Kalow W, Gelboin HV，麦克布莱德OW，冈萨雷斯FJ
人P450 IIB1的cDNA克隆、序列和cDNA定向表达:从19号染色体CYP2B位点获得的一个正常和两个变异cDNA的鉴定以及IIB mrna在人肝脏中的差异表达。
生物化学。1989 9月5日;28(18):7340-8。
- PubMed ID
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2573390 (查看PubMed］
- 摘要
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以大鼠IIB1 cDNA为探针，从人肝lambda gt11文库中分离到代表IIB基因家族中P450的完整编码序列的cDNA hIIB1。由cDNA序列推导得到的hIIB1蛋白含有491个氨基酸，分子量为56286，与大鼠IIB1蛋白氨基酸相似性达76%。用痘苗病毒系统表达该cDNA，得到了一个CO-binding谱降低的P450，最大吸收波长为452 nm。表达的人酶能够催化7-乙氧基香豆素的去乙基化。从13个肝脏中检测hIIB mRNA的总RNA水平。两个肝脏的mRNA水平较高，四个肝脏的mRNA水平中等，还有八个肝脏的mRNA水平极低，或者无法检测到。这些数据表明，hIIB1基因缺陷存在于人类中，或者hIIB1基因在我们的肝脏标本中受到调节和可变诱导。为了寻必威国际app找突变的mRNA转录本，从表达低水平hIIB1 mRNA的肝脏中构建了文库。一个命名为hIIB2的cDNA被分离出来，它与hIIB1的cDNA相同，除了它的5'端附近的DNA存在一个不寻常的改变，对应于推测的外显子4。这种改变是由29 bp的缺失和44 bp的非同源DNA的插入引起的。 This sequence replacement occurs at the junction of the third and fourth exons as predicted from the structure of the rat IIB1 gene, suggesting that a faulty splice might have given rise to the variant hIIb2 transcript.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)