ARTD10底物识别蛋白质微阵列:mono-ADP-ribosylation GSK3beta监管。

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Feijs KL, Kleine H, Braczynski Forst啊,赫尔佐格N, Verheugd P, Linzen U, Kremmer E、B路舍

ARTD10底物识别蛋白质微阵列:mono-ADP-ribosylation GSK3beta监管。

细胞Commun信号。2013年1月19日,11 (1):5。doi: 10.1186 / 1478 - 811 x - 11 - 5。

PubMed ID
23332125 (在PubMed
]
文摘

背景:虽然ADP-ribosylation被描述五年前,直到最近一直注意区分真核细胞内聚,mono-ADP-ribosylating酶。Poly-ADP-ribosylation ARTD1(原名PARP1)最出名的是它在DNA损伤修复中的作用。其他聚合物形成酶是ARTD2(原名PARP2), ARTD3(原名PARP3)和ARTD5/6(原名Tankyrase 1/2),后者参与3 bp2 Wnt信号和调节。因此poly-ADP-ribosylation已经好几个不同的功能描述,而细胞内mono-ADP-ribosylation目前主要定义。例如不知道蛋白质功能作为不同mono-ARTDs衬底。这是部分由于缺乏合适的试剂研究mono-ADP-ribosylation,这限制了当前的理解这个翻译修饰。结果:我们优化新的筛选方法采用蛋白质微阵列,ProtoArrays (R),在这里申请底物的识别ARTD10(原名PARP10)和ARTD8(原名PARP14)。这个衬底屏幕的结果使用体外ADP-ribosylation化验和重组蛋白进行验证。进一步分析小说的ARTD10衬底GSK3beta显示mono-ADP-ribosylation作为监管机制的非竞争性抑制体外激酶活性。此外,操纵ARTD10水平细胞相应GSK3beta活动的影响。 Together these data provide the first evidence for a role of endogenous mono-ADP-ribosylation in intracellular signaling. CONCLUSIONS: Our findings indicate that substrates of ADP-ribosyltransferases can be identified using protein microarrays. The discovered substrates of ARTD10 and ARTD8 provide the first sets of proteins that are modified by mono-ADP-ribosyltransferases in vitro. By studying one of the ARTD10 substrates more closely, the kinase GSK3beta, we identified mono-ADP-ribosylation as a negative regulator of kinase activity.

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糖原合成酶激酶3β P49841 细节