确定网站的酪氨酸O-sulfation在肽和蛋白质。
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于Y, Hoffhines AJ,摩尔KL, Leary农协
确定网站的酪氨酸O-sulfation在肽和蛋白质。
Nat方法。2007年7月,4 (7):583 - 8。Epub 2007 6月10。
- PubMed ID
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17558413 (在PubMed]
- 文摘
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酪氨酸O-sulfation是一个关键的翻译修饰,调节蛋白质相互作用在细胞外空间。我们描述一个减法策略来确定蛋白质的酪氨酸O-sulfation网站。羟基在unsulfated酪氨酸被化学计量乙酰化在一步反应使用sulfosuccinimidyl醋酸(S-NHSAc)咪唑在pH值为7.0。sulfotyrosine的存在显示免费的检测酪氨酸后串联质谱分析(MS / MS)分析条件下的磺酰集团sulfotyrosine是不稳定的。由于酪氨酸的磷酸化和硫酸盐化作用等压,我们使用碱性磷酸酶处理来区分这两个修改。使用这种方法,我们发现几个肽的网站和硫酸盐化作用的顺序由净化人类tyrosylprotein sulfotransferases (TPSTs),并明确地确定酪氨酸硫酸盐化作用在人类vitronectin鼠标lumican和网站。