隔离的ras GTP-binding使用原位colony-binding测定突变体。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
洛瑞拉,潘BT,罗伯茨TM,库珀通用
隔离的ras GTP-binding使用原位colony-binding测定突变体。
《美国国家科学院刊S a . 1986年7月,83(13):4607 - 11所示。
- PubMed ID
-
3088563 (在PubMed]
- 文摘
-
我们已经开发出一种策略来隔离ras基因突变基因编码蛋白质三磷酸鸟苷结合的缺陷。随机的体外诱变v-Harvey (Ha) ras表达载体之后,细胞溶解细菌菌落原位GTP-binding化验。单一氨基酸替换在ras密码子83年,119年或144年p21的亲和力下降三磷酸鸟苷25 - 100倍的增加主要是由于利率p21三磷酸鸟苷的分离。然而,这些突变基因诱导NIH 3 t3细胞转化效率与野生型v-Ha-ras相提并论。在转化细胞,p21基因突变被磷酸化在某种程度上类似于野生型v-Ha-ras p21,表明亲和力下降了100倍并不能阻止突变ras蛋白绑定三磷酸鸟苷体内。讨论了这些结果对三磷酸鸟苷的作用在p21的监管作用。