新型环amp特异性磷酸二酯酶PDE4A10的分子克隆、基因组定位、启动子鉴定及特性研究
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Rena G, Begg F, Ross A, MacKenzie C, McPhee I, Campbell L, houston E, Sullivan M, Houslay MD
新型环amp特异性磷酸二酯酶PDE4A10的分子克隆、基因组定位、启动子鉴定及特性研究
《Mol Pharmacol》2001 5月;59(5):996-1011。
- PubMed ID
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11306681 (PubMed视图］
- 摘要
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我们描述了人类cAMP磷酸二酯酶PDE4A基因的新长剪接变体HSPDE4A10的克隆和表达。825个氨基酸HSPDE4A10含有一个独特的N端46个氨基酸，由一个独特的5'外显子编码。外显子-1(4A10)位于外显子-1(4A4)下游约11千碱基对(kb)，位于PDE4A公共外显子2上游约13.5 kb。通过核苷酸序列数据库检索，我们鉴定了一个大鼠PDE4A10同源基因，并揭示了一个鼠PDE4A10同源基因。必威国际appPDE4A10转录本在多种人类细胞系和组织中被检测到。外显子-1侧翼的5'序列(4A10)显示出启动子活性，最小功能启动子区域在相应的小鼠基因组序列中高度保守。工程人PDE4A10开放阅读框在COS7细胞中的瞬时表达允许在可溶性和颗粒部分检测到121 kda蛋白。PDE4A10主要定位于COS7细胞的核周区。可溶性和颗粒形式对cAMP水解表现出相似的K(m)值(3-4微米)和抑制罗利普兰的IC(50 nM)值(50 nM)，但可溶性形式的V(max)值约为颗粒形式的3倍。在55℃时，可溶性HSPDE4A10比颗粒酶(T(0.5) = 5 min)更耐热(T(0.5) = 11 min)。 HSPDE4A10 and HSPDE4A4B are shown here to be similar in size and exhibit similar maximal activities but differ with respect to sensitivity to inhibition by rolipram, thermostability, interaction with the SRC homology 3 domain of LYN, an SRC family tyrosyl kinase, and subcellular localization. We suggest that the unique N-terminal regions of PDE4A isoforms confer distinct properties upon them.