glu - 125的重要性在人类肾二肽酶的催化活性。
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片山足立H, T,基本上H, Tsujimoto M
glu - 125的重要性在人类肾二肽酶的催化活性。
Biochim Biophys学报。1993年4月21日,1163 (1):42-8。
- PubMed ID
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8097406 (在PubMed]
- 文摘
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羧基试剂N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1 2-dihydroquinoline (EEDQ)和dansyl-ethylenediamine抑制人类肾二肽酶(hrDP)不可逆转时间的方式。Cilastatin,酶的竞争性抑制剂,部分保护酶的失活。确定网站(s)修改EEDQ dansylethylenediamine,胰蛋白酶的碎片改性酶的氨基酸序列广泛进行了分析。比较确定的氨基酸序列与预测的主要结构hrDP透露,glu - 125在Glu115-Arg138片段被修改。结果是,glu - 125催化活性的作用被定点诱变研究。glu - 125取代了谷氨酰胺、天冬氨酸和半胱氨酸残基。互补野生型和突变酶在CHO细胞表达,和由此产生的蛋白质纯化明显的同质性。变异的酶,gln - 125 - 28.5 U /毫克hrdp表现出特定的活动,相应的野生型的11.4%。相比之下,asp - 125 hrdp和半胱氨酸- 125 hrdp被发现是不活跃的野生型酶(< = 0.1%)。这些结果表明,极性侧链的长度和/或glu - 125残留酶活性是重要的。