分子克隆和功能表达人类deoxyhypusine合成酶cDNA基于表达序列标签信息。
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燕YP,陈道Y,肯塔基州
分子克隆和功能表达人类deoxyhypusine合成酶cDNA基于表达序列标签信息。
j . 1996 4月15日,315 (Pt 2): 429 - 34。
- PubMed ID
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8615810 (在PubMed]
- 文摘
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Deoxyhypusine合酶是一种NAD(+)端依赖酶,催化作用的形成Deoxyhypusine残留在真核起始因子5 (eIF-5A)前体转移一个aminobutyl一部分从亚精胺epsilon-amino群一个独特的赖氨酸残基。我们最近克隆和表征粗糙脉孢菌deoxyhypusine合成酶cDNA使用反向遗传学的方法。基因库搜索表明,推导必威国际app出的一段氨基酸序列(96个氨基酸)的粗糙脉孢deoxyhypusine合成酶匹配一个简短的人类表达序列标签(EST), Z25337,大于70%的氨基酸的身份。Gene-specific引物在此基础上是使用通用引物获得1219个基点和1078个基点的互补从人类cDNA图书馆。1219个基点和1078个基点序列,每个包含一个开放阅读框,编码多肽的氨基酸分别为368和321。短序列是一样长,除了它缺失了一段47生成氨基酸残基261 - 307。人类的368 -胺基酸序列deoxyhypusine合成酶股票高度的身份(> 50%)和相似度(> 60%)与脉孢菌和酵母deoxyhypusine合成酶。克隆到表达载体后,368 -氨基酸重组蛋白展示高deoxyhypusine合成酶活性。相比之下,321 -氨基酸重组蛋白没有可检测活动。