纯化、表征和离子绑定属性的人类大脑S100b蛋白。
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Baudier J,格拉瑟N, Haglid K, Gerard D
纯化、表征和离子绑定属性的人类大脑S100b蛋白。
Biochim Biophys学报。1984年10月23日,790 (2):164 - 73。
- PubMed ID
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6487634 (在PubMed]
- 文摘
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人类大脑S100b (beta测试版)蛋白质纯化使用zinc-dependent phenyl-Sepharose亲和色谱法。钙和锌结合蛋白质的性质研究了流透析技术和蛋白质构象在不含金属的形式和Ca2 +的存在或Zn2 +与紫外光谱法研究了含巯基的反应性和交互与疏水性荧光探针6 - (p-toluidino) naphthalene-2-sulfonic酸(TNS)。流的透析测量Ca2 +绑定到人类大脑S100b (beta测试版)蛋白质显示六Ca2 +绑定网站,我们假设每个β代表三个单体,以宏观协会常量K1 = 0.44 X 10 (5) m - 1;K2 = 0.1 X 10 (5) m - 1和K3 = 0.08 X 10 (5) m - 1。在120毫米氯化钾,蛋白质,钙的亲和力大大减少。锌结合人类S100b蛋白的研究表明,蛋白质绑定两个锌离子/β单体,与宏观常量K1 = 4.47 X 10 (7) m - 1和K2 = 0.1 X 10 (7) m - 1。全身的大部分Zn2 +绑定后发生构象变化两种S100b蛋白锌离子每摩尔。这些结果显著不同的牛蛋白质和怀疑S100的保护结构在进化过程中。钙结合研究锌的存在时,我们注意到蛋白质的亲和的增加钙、K1 = 4.4 X 10 (5) m - 1;K2 = 0.57 X 10 (5) m - 1; K3 = 0.023 X 10(5) M-1. These results indicated that the Ca2+- and Zn2+-binding sites on S100b protein are different and suggest that Zn2+ may regulate Ca2+ binding by increasing the affinity of the protein for calcium.