超加性和次加性效应的“热点”突变界面内的胎盘核糖核酸酶与血管生成素和核糖核酸酶抑制剂。
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陈CZ,夏皮罗R
超加性和次加性效应的“热点”突变界面内的胎盘核糖核酸酶与血管生成素和核糖核酸酶抑制剂。
生物化学。1999年7月20日,38 (29):9273 - 85。
- PubMed ID
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10413501 (在PubMed]
- 文摘
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以前的单诱变研究核糖核酸酶抑制剂(RI)复合物的血管生成素(Ang)和核糖核酸酶表明在这两种情况下很大一部分的结合能主要集中在一小部分的结晶学观察界面,包括国际扶轮残留434 - 438。这样精力充沛的“热点”是常见的蛋白质复合物,但其物理意义通常是不清楚的。这里我们有调查这个问题在国际扶轮通过检查详细的交互。配体热点和独立运行的程度。板式换热器的影响和阿拉巴马州替换显示关键残渣Tyr434与配体相互作用主要通过苯基环;Tyr437,哦,组织形式与核糖核酸酶的重要联系,而苯组与盎。动力学特性复合物包含多个替换显示惊人,但独特,协调国际扶轮和两个配体的相互作用。核糖核酸酶的损失结合能的复杂与置换Tyr434 Asp435, Tyr434 Tyr437,明显低于添加剂(即。2.4和1.3千卡/摩尔,分别)。相比之下,充满活力的影响434年和435年,434年和437年,替换成对的绑定和完全添加剂和2.5千卡/摩尔除了添加剂,分别。超加性(0.9 - -2.4千卡每摩尔)也观察到几个多点更换涉及这些抑制剂残留物和两个和残留物,Arg5 Lys40,从这个接口的一部分。因此,减少一些triple-variant复合物的结合能一样大8.5 - -10.1千卡/摩尔(相对于总DeltaG -21.0千卡/摩尔的野生型复杂)。 Potential explanations for these functional couplings, many of which occur over distances of >13 A and are not mediated by direct or triangulated contacts, are proposed. These findings show that the basis for the generation of hot spots can be complex, and that these sites can assume significantly more (as with Ang) or less (as with RNase) importance than indicated from the effects of single-site mutations.