精制原生人类血管生成素的晶体结构和两个活性位点变异:影响酶参与的独特功能性质neovascularisation在肿瘤生长。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
列奥尼达DD,夏皮罗R,艾伦SC,苏巴拉奥问,Veluraja K, Acharya KR
精制原生人类血管生成素的晶体结构和两个活性位点变异:影响酶参与的独特功能性质neovascularisation在肿瘤生长。
J杂志。1999年1月22日,285(3):1209 - 33所示。
- PubMed ID
-
9918722 (在PubMed]
- 文摘
-
人类血管生成素(Ang),一个不寻常的胰核糖核酸酶家族的成员,是一个强有力的体内诱导的血管生成。ribonucleolytic活动较弱(10(4)到10(6)倍低于牛核糖核酸酶A),但是似乎是重要的生物功能。Ang已经涉及建立一个广泛的人类肿瘤,因此成为一个重要的新的抗癌化合物的设计目标。我们报告的本地和高分辨率的晶体结构两种不同的形式(Pyr1 2.0 1.8和Met-1分辨率)和两个活性位点变异,K40Q和H13A 2.0决议。本机结构,加上早些时候突变和生化数据,提供一个基础理解这个分子的独特功能性质。的主要结构特点,从根本上提高血管生成素的弱点的核糖核酸酶的活动包括:(i)的阻塞pyrimidine-binding Gln117网站;(2)之间的氢键的存在Thr44 Thr80,进一步抑制嘧啶网站的有效性;(3)缺乏对应的His119-Asp121氢键强化催化在核糖核酸酶(Asp116中相应的天冬氨酸Ang,已经招募了稳定的堵塞嘧啶网站);及(iv)没有任何精确的结构与两个重要purine-binding残留的核糖核酸酶a .本机结构分析显示的细节cell-binding地区和核本地化的信号和angiogenicity至关重要。cell-binding网站大大不同于相应地区的核糖核酸酶A和其他两个同系物,eosinophil-derived神经毒素和onconase,所有这些缺乏血管生成活动。 Determination of the structures of the catalytically inactive variants K40Q and H13A has now allowed a rigorous assessment of the relationship between the ribonucleolytic and biological activities of Ang. No significant change outside the enzymatic active site was observed in K40Q, establishing that the loss of angiogenic activity for this derivative is directly attributable to disruption of the catalytic apparatus. The H13A structure shows some changes beyond the ribonucleolytic site, but sites involved in cell-binding and nuclear translocation are essentially unaffected by the amino acid replacement.