从人胎盘中提取的新型Ca(2+)结合蛋白S100P。cDNA克隆、重组蛋白表达及Ca2+结合特性研究。
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刘建军，刘建军，刘建军，等
从人胎盘中提取的新型Ca(2+)结合蛋白S100P。cDNA克隆、重组蛋白表达及Ca2+结合特性研究。
中国生物医学工程学报，1997,15(2):541- 547。
- PubMed ID
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1633809 (PubMed视图］
- 摘要
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S100蛋白家族的一个新成员，存在于人胎盘中，已经通过蛋白质测序，cDNA克隆和Ca(2+)结合特性分析进行了表征。由于胎盘蛋白的95个氨基酸残基与大脑S100蛋白α和β具有约50%的序列一致性，我们建议将其命名为S100P。在大肠杆菌中表达了该cDNA，并获得了高产的重组S100P。S100P为同二聚体，具有两个功能EF手/多肽链。低亲和力位点(Kd = 800微米)，与S100 β类似，似乎涉及n端EF手，随后可能出现酪氨酸荧光的Ca(2+)依赖性下降。由c端EF手提供的高亲和力位点影响位于c端延伸部分的唯一半胱氨酸的反应性(Cys85)。用6-炔基-2-二甲氨基萘(Prodan)在Cys85标记的S100P荧光光谱可以监测其与高亲和位点(Kd = 1.6 microM)的结合。Prodan荧光显示出Ca(2+)依赖的最大发射波长从485 nm到502 nm的红移，同时伴随着大约两倍的综合荧光强度损失。这表明Cys85在Ca(2+)结合的S100P中更容易暴露于溶剂，使得分子的这个区域，即所谓的c端延伸，成为假定的Ca(2+)依赖于细胞靶标的相互作用的理想候选者。在p11中，S100家族的另一个成员，含有相应半胱氨酸的c端延伸(p11中的Cys82)，参与与蛋白配体膜联蛋白II形成不依赖Ca(2+)的复合物。 The combined results support the hypothesis that S100 proteins interact in general with their targets after a Ca(2+)-dependent conformational change which involves hydrophobic residues of the C-terminal extension.