通过对人转录本中3'-非翻译区进行富集，分离鼠转化细胞中表达的人purH基因。
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山内M，关N，三田K，斋藤T，辻S，本吾E，森代M，盐美T，小山H, Ayusawa D
通过对人转录本中3'-非翻译区进行富集，分离鼠转化细胞中表达的人purH基因。
DNA res 1995 12月31日;2(6):269-75。
- PubMed ID
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8867801 (PubMed视图］
- 摘要
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一种减法程序被开发用于鉴定和分离在小鼠转化细胞转录的人类基因。该过程基于对小鼠转化细胞中表达的人poly(A)+ RNA的3'-未翻译区(3'-UTR)的产物进行反转录和聚合酶链反应组合扩增的减富集。为了评估该程序的能力和实用性，我们尝试从小鼠转化细胞系中恢复人purH基因，该转化细胞系最初是通过使用人中期染色体介导的基因转移技术从小鼠purH阴性突变细胞系中通过功能互补建立的。利用我们的程序，成功地鉴定和分离了转化细胞中的一部分人类转录本。以3’-UTR克隆为探针，分离得到全长cDNA，并将其导入小鼠purh阴性突变细胞，验证其生物学活性。