核苷酸突变绑定环腺苷酸激酶的大肠杆菌。
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Reinstein J,布伦M, Wittinghofer
核苷酸突变绑定环腺苷酸激酶的大肠杆菌。
生物化学。1988年6月28日,27日(13):4712 - 20。
- PubMed ID
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2844237 (在PubMed]
- 文摘
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理应基因的大肠杆菌已被用于腺苷酸激酶蛋白过表达在两个方面:(1)理应基因的启动子克隆到pEMBL质粒,拷贝数增加,和(2)通过删除理应启动子克隆regulatable tac背后的基因启动子。腺苷酸激酶由高达40%的可溶性细胞提取物含有这些质粒的大肠杆菌菌株。突变所引入的基因定点诱变交换氨基酸的核苷酸结合循环,这是高度保守的,在许多单核苷酸结合蛋白。Lys13——Gln的突变是几乎不活跃,而Pro9——亮氨酸和Gly10——Val公里增加基质和突变蛋白的Vmax与野生型相似。质子核磁共振测量的蛋白质表明主要发生了结构性变化似乎Pro9——亮氨酸和Gly10——Val突变体。根据讨论的结果是腺苷酸激酶的动力学机制和蛋白质的三维结构。