5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate合酶的大肠杆菌——底物类似物bromopyruvate灭活酶通过修改半胱氨酸- 408和赖氨酸- 411。
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黄齐QK
5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate合酶的大肠杆菌——底物类似物bromopyruvate灭活酶通过修改半胱氨酸- 408和赖氨酸- 411。
拱生物化学Biophys。1991年2月1日,284(2):407 - 12所示。
- PubMed ID
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1899181 (在PubMed]
- 文摘
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为了识别的基本活性氨基酸残基5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate合酶,酶与底物的反应模拟bromopyruvate调查。孵化酶的bromopyruvate导致酶活性的时间损失。符合一级和饱和度动力学特失活后的Kinact 28 microM,最高速率常数0.31最低为1。阻止了失活酶与底物-磷酸shikimate预孵化,5-enolpyruvylshikimate 3 -磷酸或结合shikimate +草甘膦(N-phosphonomethylglycine),酶的抑制剂。增加[3 h]硼氢化钠反应混合物的失活率没有影响而导致3 h标签的公司修改后的酶。在90%的失活,大约有1摩尔的溴(14 c)丙酮酸成立每摩尔的酶改性缺席或硼氢化钠的存在。当酶被孵化与bromopyruvate硼氢化钠[3 h]的存在,大约有1摩尔的3 h标记被发现每摩尔的修改后的酶有关。胰蛋白酶的消化这些标记蛋白之后,反相色谱分离导致三个放射性肽的隔离。分析这三种肽表明bromopyruvate灭活酶通过修改半胱氨酸- 408和赖氨酸- 411,这是守恒的所有酶序列研究。