气单胞菌属的快速净化proteolytica氨基肽酶:结晶和初步的x射线数据。
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Schalk C,雷米JM,西威尔B,莫拉D, Tarnus C
气单胞菌属的快速净化proteolytica氨基肽酶:结晶和初步的x射线数据。
拱生物化学Biophys。1992年4月,294 (1):91 - 7。
- PubMed ID
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1550363 (在PubMed]
- 文摘
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气单胞菌属的耐热氨基肽酶proteolytica纯化使用两个新的过程,目的是准备大单晶x射线分析。在第一个过程中,我们试图避免任何极端条件下能够诱导微观不均一性的蛋白质样品。酶是通过两个色谱纯化步骤基于疏水相互作用和离子交换。在第二个过程蛋白质的热处理温度70摄氏度/ 5到8 h。过程导致了electrophoretically均匀和可结晶的氨肽酶;然而,出乎意料的,晶体通过第一个过程中,除了本机氨肽酶,裂解酶的形式特征。只有本地蛋白质在场当第二个程序使用。大晶体获得本机蛋白质形式,有一个近似大小的0.4 x 0.4 x 0.6毫米,产生一种x射线衍射模式,表现出相关的对称六边形空间群P6(1) 22(或其对映体P6 (5) 22)。晶胞参数是一个a和c = 97.8 = 109.1。假设一个分子/不对称单位,VM的值= 2.6 A3 / Da和近似估计溶剂含量的45%。 Measurable diffraction intensities were observed at a resolution of 2.5 A.