亚基稳定和聚乙烯glycolation可卡因的酯酶可以提高体内停留时间。
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纳史木汗D,柯林斯GT,娘娘腔的先生,尼科尔斯J, Edwald E,陈J, Ko MC,伍兹JH Tesmer JJ, Sunahara家乡
亚基稳定和聚乙烯glycolation可卡因的酯酶可以提高体内停留时间。
摩尔杂志。2011年12月,80 (6):1056 - 65。doi: 10.1124 / mol.111.074997。Epub 2011 9月2。
- PubMed ID
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21890748 (在PubMed]
- 文摘
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没有小分子治疗可用来治疗可卡因成瘾,但enzyme-based治疗血清中水解势头加速可卡因。细菌可卡因酯酶(CocE)是已知本机酶水解最快的可卡因。然而,它的不稳定性在37摄氏度其治疗潜力有限。二硫化交联子单元通过桥接通常用于稳定multimeric酶。在此我们使用结构性方法指导的二聚体中两个半胱氨酸残基的引入界面CocE促进分子间二硫键的形成。disulfide-crosslinked酶显示改善热稳定性,尤其是当结合前所述突变增强稳定性(T172R-G173Q)。新修改的酶产生了一种非常稳定的CocE (CCRQ-CocE)保留大于90%的活动在37摄氏度41天后,代表了一种进步4700倍以上的野生型酶。CCRQ-CocE也可以由聚乙二醇(PEG)的聚合物改性,提高其在体内停留时间从24到72小时,以一个可卡因杀伤力试验,在啮齿动物实行和测量在恒河猴cocaine-induced心血管抑制效果。PEG-CCRQ引发免疫反应在啮齿动物中可以忽略不计。蛋白质亚基稳定和PEGylation因此产生潜在的治疗明显高稳定在体外和体内。