活性位点的突变体“non-hydrolyzing UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase从大肠杆菌。
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塞缪尔·J,坦纳我
活性位点的突变体“non-hydrolyzing UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase从大肠杆菌。
Biochim Biophys学报。2004年7月1日,1700 (1):85 - 91。
- PubMed ID
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15210128 (在PubMed]
- 文摘
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“non-hydrolyzing”细菌UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase催化的可逆的互变现象UDP-N-acetylglucosamine (UDP-GlcNAc)和UDP-N-acetylmannosamine (UDP-ManNAc)。这homodimeric变构酶活性衬底,UDP-GlcNAc,并认为一个亚基扮演监管角色,而其他的起着催化作用。在这个工作中,五个活性位点突变体准备(D95N, E117Q, E131Q K15A, H213N)和分析对绑定的影响,催化和变构调节。His213似乎扮演一个角色在UDP绑定也可以协助催化和/或规定,但不是一个关键的催化残基。对于绑定Lys15似乎相当重要。三个羧酸盐突变体显示k的值显著降低(猫),但值k (M)的影响相对较小。因此,这些残留在催化和/或监管的关键角色。对于E117Q、反应中间体释放到解决方案的速度堪比整体催化。这可能表明Glu117扮演的角色作为第二步的酸/碱催化剂UDP-GlcNAc差向异构化反应。三羧酸盐突变体被发现展览别构调节受损。