晶体结构的轻微活动thymidylate合酶突变体,Arg 126 - - > Glu。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
磨P, Changchien L, Maley F,蒙特福特车手
晶体结构的轻微活动thymidylate合酶突变体,Arg 126 - - > Glu。
蛋白质科学。1997年12月,6 (12):2504 - 11。
- PubMed ID
-
9416600 (在PubMed]
- 文摘
-
Thymidylate合成酶(TS)是一个长期目标的抗癌药物,对其丰富的机械特性。转储的酶催化转换使用辅酶methylenetetrahydrofolate dTMP,也许是最好的研究酶催化碳碳键的形成。Arg 126发现各种形式TSs但只有1的13个氢键抛售在催化过程中,和一个磷酸基的7。尽管如此,当自变量的TS 126大肠杆菌改为谷氨酸(R126E),由此产生的蛋白质kcat减少降低了600倍2000倍,公里。R126E决心在两个条件下的晶体结构,没有束缚的配体(2.4决议),和转储和antifolate CB3717(2.2决议)。第一个晶体,它不包含转储尽管结晶下降,它的存在显示Glu 126能够sterically和静电干扰磷酸转储的绑定。第二晶体包含转储和CB3717活性部位,但Glu 126附近三个氢键形成残留在水中(两个)和在一个位置,与正常的磷酸盐结合位点部分重叠,导致大约1磷酸基的转变。有趣的是,蛋白质显示典型的ligand-induced构象变化,146年和半胱氨酸的共价键存在于蛋白质的两个活动网站。