不活跃的N229A thymidylate合酶由于water-mediated效应:隔离甲基转移的晚期。
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Nissen雷耶斯CL,圣人CR, Rutenber EE, RM, Finer-Moore JS, Stroud RM
不活跃的N229A thymidylate合酶由于water-mediated效应:隔离甲基转移的晚期。
J杂志。1998年12月4日,284 (3):699 - 712。
- PubMed ID
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9826509 (在PubMed]
- 文摘
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突变thymidylate合成酶N229(177)丙氨酸的结果在一个基本上不活跃的酶,但它会导致形成一个稳定的三元复杂。N229动力学(177)表明,大肠杆菌kcat是减少200倍而倾倒的公里增加200倍的公里叶酸与野生型酶增加了十倍。N229的晶体结构(177)与转储和CB3717在复杂,在复杂和转储独自决定在2.4,和2.5一项决议。这些结构识别共价结合三元复杂和展示N229(177)陷阱一个中间,因此变得不活跃在下一步的反应。自从小丙氨酸侧链在N229(177)并不直接sterically损害绑定的配体,结构表明,定量限制结构水的参与网络thymidylate合成酶的活性部位在催化和确定绑定关联转储(相比之下,N229 (177) V干酪乳杆菌的突变对活动)影响甚微。