赖氨酸-67在弗氏柠檬酸杆菌GN346 C类β -内酰胺酶活性位点中的作用
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冢本K，立花K，山崎N，石井Y，宇结K，西田N，佐井T
赖氨酸-67在弗氏柠檬酸杆菌GN346 C类β -内酰胺酶活性位点中的作用
中国生物化学杂志。1990年2月22日;1(1):15-22。
- PubMed ID
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1969344 (PubMed视图］
- 摘要
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弗氏柠檬酸杆菌GN346产生C类β -内酰胺酶，显示典型头孢菌素酶的底物特征。头孢菌素酶基因由1408个核苷酸组成的结构区和启动子区被完全测序。结果表明，该成熟酶的氨基酸序列为361个，分子质量为39878 Da。活性位点被确认为Ser-64。该酶的氨基酸序列与弗氏锥虫OS60的头孢菌素酶有9个残基的差异。启动子区域的核苷酸序列表明可能存在衰减子结构。Lys-67是在A类和C类β -内酰胺酶和青霉素结合蛋白中发现的最保守的残基之一，通过定点诱变转化为精氨酸、苏氨酸或谷氨酸。Glu-67酶失去了催化活性，Thr-67酶仅显示出微量活性。Arg-67酶保留了大量的活性，被纯化。Arg-67酶对头孢菌素、头孢菌素和苄青霉素的Km值是野生型酶的13-19倍; the kcat values for the three substrates are 37%, 3%, and 36% those of the wild-type enzyme, respectively.