克隆和测序chorismate裂合酶的大肠杆菌ubiC和净化。
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尼科尔斯BP、绿色JM
克隆和测序chorismate裂合酶的大肠杆菌ubiC和净化。
J Bacteriol。1992年8月,174 (16):5309 - 16。
- PubMed ID
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1644758 (在PubMed]
- 文摘
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在大肠杆菌中,chorismate裂合酶催化生物合成泛醌的第一步,4-hydroxybenzoate chorismate转换。由4-Hydroxybenzoate 4-Hydroxybenzoate转化为3-octaprenyl-4-hydroxybenzoate octaprenyltransferase。这两种酶是由ubiC编码和ubiA分别报告了另一个附近的地图在92分钟大肠杆菌染色体。我们已经克隆了ubiCA基因簇的核苷酸序列并确定ubiC ubiA的一部分。先前确定的序列的核苷酸序列紧靠编码ubiA的很大一部分。ubiC被subcloning本地化,并制造出质粒构建。过度的ubiC允许chorismate裂合酶的纯化同质性,和n端序列分析chorismate裂合酶明确定义的开始ubiC编码区域。尽管chorismate裂合酶显示没有明显的氨基酸序列相似性4-amino-4-deoxychorismate裂合酶(4-amino-4-deoxychroismate——4-aminobenzoate),大肠杆菌pabC的产物,chorismate裂合酶生产过剩可以补充的增长要求4-aminobenzoate pabC突变株。chorismate转换为中间体的几种酶的大肠杆菌生物合成途径,chorismate裂合酶是最后被孤立和特征。