研究人类UDPgalactose-4-epimerase V94M-substituted酶与广义相关epimerase-deficiency galactosaemia。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
话虽TM, Fridovich-Keil杰
研究人类UDPgalactose-4-epimerase V94M-substituted酶与广义相关epimerase-deficiency galactosaemia。
J继承金属底座说。2000年11月,23 (7):713 - 29。
- PubMed ID
-
11117433 (在PubMed]
- 文摘
-
损害人类的酶UDPgalactose 4-epimerase (hGALE)导致epimerase-deficiency galactosaemia,与生俱来的新陈代谢与误差变量生化表示和临床结果报从温和到严重。hGALE位点的分子研究差向异构酶缺乏症患者显示出显著的等位基因异质性,提高基因型变量的可能性至少可能构成一个因素的生化和临床异质性。之前我们已经确定了一个替换突变,V94M,存在于所有患者的基因的纯合状态严重,广义形式的epimerase-deficiency galactosaemia。这里我们报告V94M-hGALE酶的进一步研究,过表达和纯化null-background酵母表达系统。我们的研究结果表明,相对于野生型酶的突变蛋白受损主要的Vmax而不是公里。研究使用UDP-N-acetylgalactosamine作为竞争对手UDPgalactose进一步证明的Km值这两个底物随小于3倍为野生型和突变体蛋白质。最后,我们有V94M替换的易感性的影响进行了探讨酵母表达人类盖尔半乳糖毒性,包括半乳糖的含量变化1-phosphate (gal-1-P)积累在这些细胞暴露于半乳糖后在不同的时间。我们观察到一个逆盖尔活动水平之间的相关性的程度表示在给定的文化和半乳糖毒性观察。我们进一步观察到盖尔活动水平之间的负相关表达文化和gal-1-P积累在细胞的浓度。这些数据支持了假设gal-1-P水平升高可能是观察到毒性的基础。 They further raise the intriguing possibility that yeast may provide a valuable model not only for assessing the impact of given patient mutations on hGALE function, but also for exploring the metabolic imbalance resulting from impaired activity of GALE in living cells.