5 S的主要结构单元的transcarboxylase推断从基因组DNA序列。
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桑顿CG, Kumar g·谢诺公元前hasse还FC,菲利普斯NF,公园VM,无功功率WJ, Hejlik DP,木头HG, Samols D
5 S的主要结构单元的transcarboxylase推断从基因组DNA序列。
2月。1993年9月13日,330 (2):191 - 6。
- PubMed ID
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8365490 (在PubMed]
- 文摘
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从丙酸菌属Transcarboxylase shermanii是一个复杂的biotin-containing 30多肽的三种不同类型组成的酶。它是由六个二聚的外部单元与中央圆柱hexameric亚基通过12 biotinyl单元;三个外部单元每个表面上中央六聚体。每一个外二聚体称为5 S亚基的同事有两个biotinyl子单元。酶催化的两步反应methylmalonyl-CoA和丙酮酸形成propionyl-CoA oxalacetate, 5 S亚基特别是催化这些反应之一。这里我们报告克隆,测序和5 S亚基的单体的表情。匹配发现的基因氨基酸序列来自孤立的5 S肽与推导出一个开放阅读框出现在序列克隆p shermanii已知基因组片段包含1.3 S biotinyl亚基基因编码。克隆的5 S基因编码519个氨基酸的蛋白质,57793 (r)。推导出序列显示地区广泛的同源性与丙酮酸羧化酶和oxalacetate脱羧酶,两种酶催化相同或相反的反应。片段subcloned进pUC19取向,5 S的开放阅读框可以表达lac启动子的向量。 Crude extracts prepared from these cells contained an immunoreactive band on Western blots which co-migrated with authentic 5 S and were fully active in catalyzing the 5 S partial reaction. We conclude that we have cloned, sequenced and expressed the monomer of the 5 S subunit and that the expressed product is catalytically active.