辅酶A酯和两个新酶的参与,一个enoyl-CoA水合酶和CoA-transferase crotonobetaine水化的左卡尼汀的大肠杆菌。
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Elssner T, Engemann C,坐落惠普克雷贝尔Baumgart K
辅酶A酯和两个新酶的参与,一个enoyl-CoA水合酶和CoA-transferase crotonobetaine水化的左卡尼汀的大肠杆菌。
生物化学。2001年9月18日,40 (37):11140 - 8。
- PubMed ID
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11551212 (在PubMed]
- 文摘
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两种蛋白质(CaiB和酋长)被发现的可逆的生物转化催化crotonobetaine左卡尼汀在大肠杆菌的存在辅被用物(例如,gamma-butyrobetainyl-CoA或crotonobetainyl-CoA)。CaiB (45 kDa)和酋长(kDa 27日)在两步纯化从超表达菌株电泳同质性。CaiB被确认为crotonobetainyl-CoA:肉碱CoA-transferase MALDI-TOF质谱和酶化验。展品高辅被用物特异性酶- CoA trimethylammonium化合物的衍生品。特别是,CaiB显示显著的n端与其他CoA-transferases身份(例如,FldA sporogenes梭状芽胞杆菌,Frc从Oxalobacter formigenes,和BbsE Thauera aromatica)和CoA-hydrolases(例如,从真细菌BaiF sp。)。酋长被证实是一个crotonobetainyl-CoA水合酶使用MALDI-TOF质谱和酶化验。除了crotonobetainyl-CoA酋长也能够与显著降低水合物crotonyl-CoA Vmax(10倍(3))但不是crotonobetaine。酋长的底物特异性,其同源性crotonase证实这种酶的新成员crotonase总科。总结这些结果,验证,水化crotonobetaine左卡尼汀的收益在两个步骤:辅酶a水平的酋长催化水合crotonobetainyl-CoA L-carnitinyl-CoA,其次是辅酶a从L-carnitinyl-CoA crotonobetaine, CaiB催化。当gamma-butyrobetainyl-CoA用作辅被用物(CoA捐赠),第一个反应是辅酶a转移。 The optimal ratios of CaiB and CaiD during this hydration reaction, determined to be 4:1 when crotonobetainyl-CoA was used as cosubstrate and 5:1 when gamma-butyrobetainyl-CoA was used as cosubstrate, are different from that found for in vivo conditions (1:3).