专业g突变的铰链arabinose-binding蛋白质绑定和改变提高特异性。Sugar-binding和晶体研究。
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Vermersch PS, Tesmer JJ,柠檬DD, Quiocho足总
专业g突变的铰链arabinose-binding蛋白质绑定和改变提高特异性。Sugar-binding和晶体研究。
生物化学杂志。1990年9月25日,265 (27):16592 - 603。
- PubMed ID
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2204627 (在PubMed]
- 文摘
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L-arabinose-binding蛋白(ABP)大肠杆菌结构由两种截然不同的球状域由铰链连接的三个独立的肽段。树胶醛醣绑定和完全隔离在两个域之间的深裂。减少亲和力,ABP也结合D-galactose(减少约2倍)和D-fucose(减少约40倍)。实验进行探索糖绑定的角色ABP的铰链连接两个域。增加铰链区域的灵活性,为脯氨酸甘氨酸被替换下场在254年由定点诱变的位置。意外,这种突变导致戏剧性的增强半乳糖绑定在阿拉伯糖。突变为半乳糖ABP的亲和力增加了20倍,而阿拉伯糖和海藻糖保持相对不变。我们测量的协会和离解率g - 254 ABP与L-arabinose D-galactose, D-fucose和已经确定蛋白质的晶体结构和三种糖。配体结合动态测量和结构分析表明,改变特异性是由于一个有效增加刚性铰链的封闭的构象在半乳糖诱导产生的约束力。稳定接触形成链之间的铰链在g - 254 ABP当半乳糖注定没有发现与其他糖或者配体复合物野生型蛋白。