结构/功能的人类Ga1beta1 3-glucuronosyltransferase。二聚作用和功能活动由两个半胱氨酸残基至关重要。
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Ouzzine M, Gulberti年代,网友P, Magdalou J, Fournel-Gigleux年代
结构/功能的人类Ga1beta1 3-glucuronosyltransferase。二聚作用和功能活动由两个半胱氨酸残基至关重要。
生物化学杂志。2000年9月8日;275 (36):28254 - 60。
- PubMed ID
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10842173 (在PubMed]
- 文摘
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Galbeta1 3-glucuronosyltransferase (GlcAT-I)催化葡萄糖醛酸残渣的转移到三糖底漆glycosaminoglycan-protein联系地区的早期步骤中扮演着重要的角色葡糖氨基葡聚糖的生物合成。为了了解酶的结构/功能,人类的重组毕赤酵母属酵母中表达GlcAT-I被成功pastoris, 43 kDa的分子质量。膜结合蛋白的电泳淌度的分析在nonreducing和减少的情况下,交联一起研究,表明膜结合GlcAT-I disulfide-linked二聚体形成的活跃。GlcAT-I表示没有预测的氨基端胞质尾或分泌多肽缺乏胞质尾和跨膜域是类似的组织为二聚体,表明二聚状态的结构性因素是本地化腔的域的蛋白质。此外,半胱氨酸的角色(33)和半胱氨酸(301)在这个过程中被定点诱变结合化学改性研究GlcAT-I N-phenylmaleimide。更换半胱氨酸(33)和丙氨酸废除二聚体的形成与伴随的催化效率下降主要是由于明显的最大速度和减少UDP-glucuronic酸的亲和力。另一方面,N-phenylmaleimide治疗或丙氨酸替代的半胱氨酸(301)残留灭活酶。为我们的研究表明,GlcAT-I被组织为由于二硫键形成由半胱氨酸(33)在阀杆地区本地化,而残渣半胱氨酸(301)局部守恒的c端域是严格要求的功能完整性酶。