嵌合体的生化和结构特性由交换cofactor-binding域酒精脱氢酶的嗜热、嗜中温微生物。
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Goihberg E,佩雷茨M,电话或年代,Dym O,西蒙·L, Frolow F, Burstein Y
嵌合体的生化和结构特性由交换cofactor-binding域酒精脱氢酶的嗜热、嗜中温微生物。
生物化学。2010年3月9日,49(9):1943 - 53年。doi: 10.1021 / bi901730x。
- PubMed ID
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20102159 (在PubMed]
- 文摘
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cofactor-binding域(153 - 295)残留的酒精脱氢酶的嗜热生物Thermoanaerobacter brockii (TbADH)的嗜中温细菌beijerinckii梭状芽胞杆菌(CbADH)和原生动物寄生虫痢疾阿米巴(EhADH1)交换。三个嵌合体。cofactor-binding域的第一个嵌合体,高温TbADH取代cofactor-binding域的嗜中温总理CbADH[嵌合体Chi21 ((TCT)]。这个领域交换显著动摇父嗜热酶(DeltaT(1/2) = -18摄氏度)。相反的交易所CbADH[嵌合体Chi22 ((CTC))],然而,几乎没有父母嗜中温蛋白质热稳定性的影响。此外,用cofactor-binding域的同源域TbADH EhADH1[嵌合体Chi23((春节))]的热稳定性大大降低高温抗利尿激素(DeltaT(1/2) = -51摄氏度),阻碍了酶的寡聚化。所有三个嵌合蛋白质和基因定点突变体的结晶,及其三维(3 d)结构确定。嵌合体的3 d结构的比较和嵌合的结构突变父母adh Calpha链没有显著变化,表明这三个家长的热稳定性的差异抗利尿激素及其嵌合突变可能是由于有限数量的替换位于战略位置,齐聚反应的主要接口。的确,稳定嵌合体的实现,在很大程度上,通过引入一个脯氨酸残基在主要的战略地位马肝ADH-type二聚接口(DeltaT(1/2) = 35摄氏度)或通过引入intersubunit静电相互作用(DeltaT(1/2) = 6摄氏度)。