纯化、表征和沙门氏菌的高效液相色谱法测定glucose-1-phosphate thymidylyl-transferase从克隆rfbA基因。
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林奎斯特L, Kaiser R,李维斯公关,林德伯格AA
纯化、表征和沙门氏菌的高效液相色谱法测定glucose-1-phosphate thymidylyl-transferase从克隆rfbA基因。
211欧元。1993 2月1;(3):763 - 70。
- PubMed ID
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8382158 (在PubMed]
- 文摘
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我们报告的纯化和表征glucose-1-phosphate thymidylyl-transferase,第一个致力于四个酶生物合成的dTDP-L-rhamnose沙门氏菌菌株LT2。极大地促进了净化rfbA基因编码该酶的克隆。纯酶是通过109倍浓缩在三层析步骤。的glucose-1-phosphate thymidylytransferase催化一个可逆双分子的基团转移反应和动力学测量表明,它由一个“乒乓球”机制。dTTP和α的Km值d葡萄糖1-phosphate正向反应的0.020毫米和0.11毫米,分别。dTDP-D-glucose逆反应的Km值和二磷酸是0.083毫米和0.15毫米,分别。酶还接受UTP和UDP-D-glucose alpha-D-glucosamine 1-phosphate同样被接受以及alpha-D-glucose 1-phosphate。的NH2-terminal序列glucose-1-phosphate thymidylyl-transferase同意序列预测orf6.1基因的核苷酸序列的rfb基因簇。SDS /页31 kDa同意和亚基的质量估计计算从氨基酸组成推断orf6.1基因的核苷酸序列(32453 Da)。