延胡索酸酶的突变区分活性部位和附近的二羧酸结合位点。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
韦弗T,李米,Banaszak L
延胡索酸酶的突变区分活性部位和附近的二羧酸结合位点。
蛋白质科学。1997年4月,6 (4):834 - 42。
- PubMed ID
-
9098893 (在PubMed]
- 文摘
-
延胡索酸酶C两种突变形式从大肠杆菌已经使用PCR和DNA重组。蛋白质的重组形式包括组氨酸的手臂在c端促进净化。根据先前的研究,两种不同的羧酸结合位点,标记为A和B,观察野生型的晶体结构和抑制酶的形式。组氨酸在每一个网站是一个天冬酰胺突变。H188N在特定的网站导致大量减少活动,而H129N突变在b区域基本上没有效果。的结果,我们得出这样的结论:一个网站确实是活跃的网站,和双重角色H188作为一个潜在的催化基础提出。两个突变体蛋白的晶体结构产生了一些意想不到的结果。两种突变的亲和力降低羧酸在各自的网站。H129N突变应该在未来的动力学研究特别有用,因为它sterically街区的b区域carboxyamide天冬酰胺假设的位置配体的羧酸盐。H188N突变的活性部位,新的天冬酰胺侧链仍然与一个活跃的站点,水似乎在微微颤抖的突变。