的催化作用的动力学和光谱分析H79蛋氨酸氨肽酶的大肠杆菌。
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沃特森SJ, Mitra年代,Swierczek SI,贝内特B, Holz RC
的催化作用的动力学和光谱分析H79蛋氨酸氨肽酶的大肠杆菌。
生物化学。2008年11月11日,47 (45):11885 - 93。doi: 10.1021 / bi801499g。Epub 2008年10月15日。
- PubMed ID
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18855426 (在PubMed]
- 文摘
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来洞察的作用严格守恒的组氨酸残基,H79,反应机理的methionyl氨肽酶的大肠杆菌(EcMetAP-I) H79A突变酶制备。有限公司(II))下载H79A展览整体> 7000倍降低特定的活动。几乎完全丧失的活动主要是由于> 6000倍降低k猫。有趣的是,K m值获得有限公司(II))下载H79A大约是一半的值观察野生型(WT) EcMetAP-I。因此,k猫/ k m值仅下降3000倍。另一方面,观察到的特定活动的锰(II))下载H79A EcMetAP-I下降了约2.6倍,而k猫下降了约3.5倍。锰(II)的观察K m值)下载H79A EcMetAP-I大约是1.4倍大于WT EcMetAP-I观察到,导致低K猫/ K m值的约3.4倍。金属绑定,紫外吸收和电子顺磁共振数据表明H79的活性部位是平静的突变,提出了x射线晶体数据。动力学同位素数据表明H79并不一个质子转移到新形成的胺自一个质子转移的过渡态WT和H79A EcMetAP-I酶。因此,H79函数通过氢键位置底物肽键的组胺或羰基支柱。 Together, these data provide new insight into the catalytic mechanism of EcMetAP-I.