大肠杆菌thioesterase我,结构基因的分子克隆和测序和识别作为一个周质的酶。
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曹H, Cronan我小
大肠杆菌thioesterase我,结构基因的分子克隆和测序和识别作为一个周质的酶。
生物化学杂志。1993年5月5日,268 (13):9238 - 45。
- PubMed ID
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8098033 (在PubMed]
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结构基因的大肠杆菌thioesterase我(称为德莎)已被使用克隆的序列数据获得纯化的蛋白质。德莎基因映射在530对碱基配对的物理图谱大肠杆菌大肠杆菌遗传图谱(11.6分钟)。德莎基因的DNA序列和推导获得的蛋白质序列显示thioesterase我由182个氨基酸,分子质量20.5 kDa。比较DNA和蛋白质序列的数据显示一个领导者的26个氨基酸残基序列从主翻译产品裂解,并证实了该处理NH2-terminal测序的主要翻译产品在体外合成。这些数据预测,thioesterase我(长认为是胞质蛋白)导出到细胞周质,预测支持释放酶的细胞渗透压休克。德莎蛋白质序列不表现出任何重要的整体与其他已知的蛋白质序列相似性,尽管序列包含两个小元素序列中发现其他几个thioesterases。这些元素之一是类似于丝氨酸酯酶活性位点序列中发现丝氨酸蛋白酶和其他四个thioesterases。丝氨酸残基在这个德莎元素被证明与[3 h]二异丙基共价标记fluorophosphate,德莎活动的一个强有力的抑制剂。序列的第二个元素是histidine-containing序列找到接近的羧基末端还发现羧基末端的丝氨酸thioesterases四种已知活跃。thioesterase我的生理作用还不清楚。 A strain carrying a null mutation of the tesA gene was constructed and found to have no growth phenotype. Moreover, a strain carrying a plasmid that gave massive overproduction of TesA (approximately 100-fold higher than that of the wild type) also grew normally. In addition a strain containing double null mutations in both tesA and tesB (the structural gene for E. coli thioesterase II) also failed to display any growth phenotype. Analysis of the fatty acid compositions of phospholipid, lipid A, and lipoprotein of the above strains showed no significant changes from a wild type strain.